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納米硅球

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基于質(zhì)譜的蛋白鑒定和表征策略是,蛋白質(zhì)從生物樣本中提取出來(lái)后采用自下而上或者自上而下的分析方法。前者,復雜混合物中的蛋白質(zhì)通過(guò)酶解后可以被多肽指紋質(zhì)譜直接采集或者進(jìn)一步在線(xiàn)分離后經(jīng)串聯(lián)質(zhì)譜分析。而鳥(niǎo)槍法是將蛋白質(zhì)混合物完全酶解為大量肽段后,運用多維度液相分離后經(jīng)串聯(lián)質(zhì)譜分析。后者,復雜的蛋白質(zhì)混合物經(jīng)由分級純化為單一蛋白質(zhì)組分或者較為簡(jiǎn)單的蛋白質(zhì)混合物,隨后離線(xiàn)打入質(zhì)譜中進(jìn)行完整蛋白測量和碎裂分析?,F在,科學(xué)家們常常采用在線(xiàn)的液相質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行大隊列蛋白質(zhì)組
學(xué)鑒定。

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 經(jīng)典自下而上質(zhì)譜蛋白質(zhì)組分析策略:

l  鳥(niǎo)槍法,亦稱(chēng)發(fā)現蛋白質(zhì)組。其產(chǎn)生的數據庫能夠進(jìn)行生物樣本中龐大數量的蛋白質(zhì)鑒定,針對較高豐度的蛋白質(zhì)分析重現性非常好。

l  相比發(fā)現蛋白質(zhì)組方法,明確方向地鑒定、定量分析特定的預定蛋白質(zhì)組,方法重現性更佳。

l  靶向蛋白質(zhì)組以更高檢測靈敏度和動(dòng)態(tài)范圍定量分析預先選定的小片段蛋白質(zhì)組。

l  采用DIA分析的質(zhì)譜儀器,使得鑒定樣本中所有蛋白質(zhì)成為可能。



 

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